若细菌含有丙酮酸脱羧酶，可以将细菌分解葡萄糖产生的丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在碱性环境下可被氧化生成二乙酰，二乙酰再与含有胍基的化合物反应，生成红色的化合物，即为V-P实验阳性。产气肠杆菌含有丙酮酸脱羧酶，故V-P实验为阳性，大肠埃希菌不含有丙酮酸脱羧酶，故V-P实验为阴性。