银染测序

银染测序的原理：

银染色法是今年来建立的一种非放射性同位素标记的DNA序列测定方法。其基本原理是通过高灵敏度的银盐显色步骤来检测末端终止法完成的测序凝胶条带。银染测序系统利用线性扩增，热循环等步骤获得银染检测所需的足够DNA量，在一天内完成序列反应，电泳分离，并获得数据。该方法可以在电泳结束后一个半小时内得出结果，同时也省去了放射性同位素操作过程中的特殊防护措施。与荧光染料标记方法比较，荧光及化学发光技术需要昂贵的试剂来标记引物或底物，同时需要昂贵的仪器来检测。银染色测序法使用普通的寡核苷酸引物，无需在引物5'-OH末端或底物进行任何修饰，也不需要复杂的仪器设备来检测结果，可以在显色后的胶上直接读序。该法快速、安全、费用低，而成为酶法测序分析中的重要测序系统。银染测序包括：模板制备；测序反应；序列胶电泳分离；银染显色 结果与读序。银染法测序凝胶制备方法同STR复合扩增产物银染检测，采用特殊方法分别处理测序凝胶的长短两块玻璃板，使电泳结束后凝胶能够附着在短玻璃板上，而与长玻璃板能够比较容易分离，凝胶在短玻璃板的托载下，能够方便地进行显色操作。