LDH-L
乳酸脱氢酶测定试剂(LDH-L)(DGKC,L→P)
【注册产品标准】YZB/国 1964-2003 ◇ 【医疗器械注册证号】京药监械(准)字2005第2400410号
货号,规格
TYA-1008:R1-4×40 ml,R2-4×10 ml
TYB-1008:R1-8×40 ml,R2-8×10 ml
TYC-1008:R1-80 ml,R2-20 ml
ZYA-1008:R1-2×80 ml,R2-2×20 ml
ZYB-1008:R1-3×60 ml,R2-45 ml
ZYC-1008:R1-5×40 ml,R2-50 ml
ZYD-1008:R1-2×80 ml,R2-2×20 ml
ZYE-1008:R1-4×50 ml,R2-50 ml
用途本试剂适用于人血清或血浆中乳酸脱氢酶的体外定量分析.
临床意义乳酸脱氢酶主要存在于心,肾,肝和肌肉组织中,当这些组织遭损害时,会导致LDH的升高,乳酸脱氢酶的升高与心肌梗塞,肾损伤,肝炎及肌肉疾病有关.
方法学原理在PH8.9的环境下,LDH催化乳酸形成丙酮酸,同时使氧化型辅酶Ⅰ(NAD+)受氢形成还原型辅酶Ⅰ(NADH),后者在340nm波长下吸光度的增加与LDH的活力成正比.
LDH
L-乳酸+NAD+ → 丙酮酸+ NADH+H+
试剂组成
试剂1(R1)
Tris 50mmol/L
L-乳酸锂 51.6mmol/L
稳定剂,保护剂 适量
试剂2(R2)
Tris 50mmol/L
NAD+ 8mmol/L
适用仪器ZYA-1008:适用于日立7060/7150,岛津7200/ 7300/8000全自动生化分析仪;
ZYB-1008:适用于日立7170 A /7170,奥林巴斯AU400 /600/1000全自动生化分析;
ZYC-1008:适用于日立7020全自动生化分析仪;
ZYD-1008:适用于贝克曼CX系列全自动生化分析仪;
ZYE-1008:适用于东芝全自动生化分析仪;
TYA-1008,TYB-1008,TYC-1008:适用于其它全自动生化分析仪及各类半自动生化分析仪.
试剂贮存及稳定性试剂自生产日期起2—8℃存放稳定12个月;R1,R2按4:1比例混为工作液2—8℃可稳定5天.
标本要求不溶血的血清或肝素抗凝血浆,抗凝剂不宜用草酸盐.
测定方法1. 试剂准备
若双试剂检测,该试剂盒可直接使用,无需配制;若单试剂操作,将R1与R2按 4:1比例混为工作液.
2. 基本参数
测定模式 速率法 样品量 5ul
延迟时间 60秒 R1 200ul
测定时间 60秒 R2 50ul
温度 37℃ 主波长 340nm
比色杯光径 1cm 副波长 405nm
F值 8199
3. 测定
a. 手工,半自动及单一试剂的全自动测定
按需要量将R1,R2以4:1比例配制工作液,平衡至测定温度.
加入物
空白管
测定管
DH2O
20ul
-
标本
-
20ul
工作液
1.0ml
1.0ml
混匀, 37℃延迟时间60秒,测定时间60秒,测定△A/分.
b. 双试剂全自动生化仪测定
加入物
空白管
测定管
DH2O
5ul
-
标本
-
5ul
R1
200ul
200ul
混匀,37℃恒温1-5分钟
R2
50ul
50ul
混匀, 37℃延迟时间60秒,测定时间60秒,测定△A/分.
4. 结果计算
LDH-L(U/L)=△A/分×F
Vt
F =——————×103
Vs×ε×L
Vt = 反应液总体积(ul)
Vs = 样本体积 (ul)
L = 比色杯光径(cm)
ε= NADH在340nm处的毫摩尔吸光系数,为6.22
LDH-L(U/L)= △A/分×8199(37℃)
试剂性能
1. 线性范围:0-1600U/L
2. 精密度:批内瓶间差CV≤4.7%
批间差CV≤5.9%
3. 准确度:以国际公认的质控血清(如Roche公司生产的质控血清)为检测样本时,测定值在质控血清规定的可接受范围内.
4. 空白吸光度:小于0.600A
注意事项
1. 可根据仪器要求按比例改变标本,试剂用量.
2. 工作液空白吸光度大于0.600A时请勿使用.
3. 建议每次实验皆做空白管.
4. 生化仪光径不为1cm时,F=8199/光径(cm).
参考值
114—240U/L
建议各实验室建立自己的参考值范围.