自杀质粒
自杀质粒(suicide plasmid):通常为R质粒的衍生质粒,常有宿主范围广的特点,具有接合转移基因。它的复制需要一种特殊的蛋白,大多数细菌不产生这种蛋白质,因此,当进入寄主细胞时,要么不能复制,被消除,要么被整合入染色体上,和染色体一起复制。利用自杀质粒的这个特点,将基因工程技术构建的基因缺失的DNA片断,克隆入自杀质粒,利用缺失基因两端的同源片断,定位自杀质粒的整合位点。利用同源性DNA片断可发生重组的原理,构建精确基因缺失菌株。在多数情况下,利用自杀质粒,可随心所欲缺失大多数基因的任何部分。
用自杀质粒系统构建基因缺失工程菌,关键在于选择适当的自杀质粒,自杀质粒应具备以下条件:①自杀质粒在受体菌中不能复制;②自杀质粒必须带有一个在整合到染色体内以后可供选择的抗性标记;③自杀质粒带有易于克隆的多克隆位点。
另参见自杀载体