负染色法

王朝百科·作者佚名  2010-07-18  
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负染色法negative staining的染色处理过程主要并非针对菌体本身,故又称“衬托染色法”。是一种易于在电子显微镜下观察试样的微细结构的方法。它是用磷钨酸钠、醋酸氧铀等电子密度高的物质,嵌入生物试样的间隙,根据产生的对比进行观察,而非原来意义上的物质染色。它与通常在电子显微镜中所得的阳面物像不同,而是阴面物像,因而有此名称。解像力可达0.5微米以下。

最早由S.Brenner和R.Horne,(1959)用于病毒粒子的观察,以后利用此法很快地积累了病毒、细菌以及分层蛋白质的微细结构等方面的知识。

负染色法需要使用酸性染料来染色,如伊红或苯胺黑。因为细菌体表面带负电,而酸性染料的色原也带负电,所以色原只能将背景染色。没有染色的细胞在染色背景下就能很容易的观察到。在负染色法中,标本不需要热固定,细胞不会因为化学药物的影响而变形,对于不易染色的细菌或病毒也能观察。

 
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