Sanger's法

S[1]anger是英国生物化学家利用酶解图谱法确定了RNA中各种碱基的排列顺序和DNA中核甙酸的排列顺序Sanger酶学法的原理[2]即用双脱氧核苷酸作为链终止试剂，通过聚合酶的引物延伸产生一系列大小不同的分子后再进行分离的方法。测序引物与单链DNA模板分子结合后，DNA聚合酶用dNTP延伸引物。延伸反应分四组进行，每一组分别用四种ddNTP中的一种来进行终止，再用PAGE分析四组样品。双脱氧核苷酸在脱氧核糖上没有聚合酶延伸链所需要的3’－OH基团，所以可被用作链终止试剂。从得到的PAGE胶上可以读出我们需要的序列