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原位转化

王朝百科·作者佚名  2011-03-29  
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原位转化是一种简单的植物转基因技术,区别于传统的转基因方法的最大特点是原位转化不需要组织培养,不需要诱导愈伤。

同传统转基因的区别目前的转基因技术可分为物理法、化学法以及生物学方法。而无论哪一种方法都主要依靠转化细胞的脱分化和再分化这一组织培养植株再生过程实现外源基因的转移,获得转基因植株。但是该途径也有其局限性:如组织培养及转化再生能力的基因型依赖性比较强, 即使在拟南芥这种模式植物中, 不同的生态型及各种突变体的转化难易程度差异都很大。况且有些物种,难于进行组织培养(recalcitrant species);有些物种存在着可再生细胞和转化感受态细胞部位不一致的问题,造成逃逸体、嵌合体、转化率低下等;有的物种农杆菌与受感染细胞间易产生过敏性反应(hypersensitive response), 导致感染部位的褐化和坏死(贾士荣,1994)。涉及组织培养转化途径的另一个问题是细胞脱分化和再分化中产生的体细胞变异以及转基因株的育性降低或丧失,这有可能干扰转基因株的分析及利用。

植物原位转基因方法(in planta transfoITnfl—tion)的根本特点就在于它不需要组织或细胞培养手段而达到植物在活体(in vivo)而非离体(vitro)状态下的转化。自然发生的突变, 要能成为一个遗传性状,必须发生在它可以遗传的组织细胞(genetically effective cells) 中。与此类似, 外源基因的插入引起的人为突变,如果不依靠转化细胞的组织培养脱分化与再分化途径,外源基因也只有进入配子体细胞中,才可以得到遗传。

技术发展自六十年代中期,即有使用裸DNA转化可遗传组织细胞的报道。之后,在70年代,除了继续有类似转化方法的报道外,一些报道也遭到了相当大的质疑。随着80年代在不同国家出现的新的成功事例,特别是随着农杆菌介导的转基因技术的出现,这类利用可遗传组织细胞的转基因方法又重新受到重视。90年代至今,该方向研究除了在方法上的改进及在转化物种上的扩展外,对农杆菌介导的原位转化机制的研究也取得了一定的进展。

 
 
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