ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术(ATP-TCA)
ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术概述化学治疗是肿瘤的三大治疗手段之一。近30年来，虽然某些恶性肿瘤的化学治疗有明显改善，但多数肿瘤，特别是实体瘤疗效仍不理想。这与肿瘤存在个体差异性，以及多重耐药性等因素有关。
因此如何选择有效药物，进行有的放矢的治疗早已成为化疗界所关注的问题。1. 主要的药敏检测方法及其存在的问题药敏检测方法
存在问题
集落形成法（HTCA）
标本可评价率低，仅有40~70％。
实验周期长，需要2周以上。
测试药物种类和数量有限。
操作繁琐，难以标准化。
阳性预测值较低，仅有40～60％。
四唑蓝比色法 (MTT)
敏感性较差，最低仅能检测500个细胞。
量程较小，有效量程在2.0以内。
细胞毒性差异染色法 (DiSC)
可适用标本类型不广，目前仅用于血液肿瘤。
人为判断因素较大，难以推广。
标本可评价率不高，仅有70～80％。
阳性预测值较低，仅有70～80％。
胸腺嘧啶掺入法 (3H-T)
实验人员接触放射，不利于健康。
标本可评价率不高，仅有70～80％。
测试结果仅能反映少量处于增殖相的肿瘤细胞。
对某些药物的测试结果存在假阴性。
2.理想的药敏检测方法应该具备的条件（1）操作简便，可以标准化，便于推广。
（2）标本可评价率高。
（3）检测敏感、可靠、客观。
（4）具备产业化条件。3.ATP-TCA技术原理荧光酶（luciferase）在有氧条件下,可以和荧光素（luciferin）结合后催化ATP转变成AMP,并且释放出荧光（波长为562nm）。ATP-TCA通过荧光酶-荧光素催化反应测定细胞内ATP含量来反映活细胞的数量。比较药物系列浓度对培养细胞的不同抑制率，参照相应判断指标，从而可以评估该化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效果。4. ATP生物荧光药敏检测技术的优点（1）敏感性好 可检测最少10个细胞。而其他技术则一般需要500个细胞以上
（2）可评价率高 标本可评价率在90%以上
（3）快速检测 完成ATP检测仅需30分钟，而其它方法需1～4小时的孵育时间
（4）量程宽 检测线性范围为10～100000个细胞/孔（96孔培养板）
（5）精密度好 变异系数（CV）小于10%，在国家标准（10%）的范围内
（6）结果准确 整体预测值为86%
（7）检测效率高 同时动态检测评估化疗药物6个剂量下对肿瘤的杀伤作用
（8）高通量检测 适合96、384、1536孔板检测分析
（9）自动化程度高 实验数据计算机软件自动分析，分析结果直观可靠
（10）稳定性好 具备产业化条件5.适用肿瘤类型神经母细胞瘤 黑色素瘤
甲状腺癌 结直肠癌
乳腺癌 卵巢癌
胰腺癌 肉瘤
胃癌 肺癌6.适用肿瘤标本类型（1）实体瘤标本
（2）胸腹水
（3）活检淋巴结标本7.ATP-TCA评价标准强敏感(SS)： IC50<25%及IC90<100%PPC
中度敏感(IS)：IC50<25%及IC90>100%PPC
轻度敏感(MS)：IC50>25%及IC90<100%PPC
耐药(R)： IC50>25%及IC90>100%PPC
注：（IC90:抑制90%肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比，
IC50:抑制半数肿瘤细胞生长的血浆峰值浓度百分比，
PPC:一定临床用药剂量对应的血浆峰值浓度。）8.ATP-TCA技术的核心试剂（1）荧光酶试剂
热稳定性和发光效率均好的重组酶试剂保证检测的敏感性和可靠性，满足临床实际工作的
（2）培养基
肿瘤细胞选择性培养基支持肿瘤细胞生长增殖，促进正常细胞死亡，从而保证药敏检测的肿瘤细胞特异性。
ATP-TCA技术进展及意义1. 国内外研究历史回顾（1）1982年，Moyer等首先提出内源性ATP的含量可以反映细胞活性;随后Kangas等相继证实生物荧光技术是一种敏感、可靠的确定各种细胞活性的检测方法。
（2）自1988年，Sevin首先将此方法用于新鲜肿瘤组织的药敏检测，在欧洲和美国已经进行了大量的临床应用研究。
（3）1998年，Kurbacher等人报道了ATP-TCA辅助化疗与传统化疗比较的临床Ⅱ期试验结果，试验结果表明，ATP-TCA指导的化疗治疗复发性卵巢癌较传统化疗模式更能提高临床疗效，延长病人总生存期和无进展生存期。
（4）NIH的GOG (Gynecologic Oncology Group)项目组认为ATP-TCA是最有发展前途的一种药敏试验方法，已纳入重点科研项目(1998)。
（5）至今该技术的临床应用相关文献已有200余篇。
（6）国内进展，北京金紫晶生物医药技术有限公司率先生产出来ATP-TCA肿瘤药物敏感性检测试剂盒，并已投入生产和使用。2.目前先进国家对该技术的评价（1）1998年德国DCS公司将该技术产业化，并获得国际ISO质量评估体系认证，在欧洲和北美市场获得准入。
（2）2001年，美国全国医疗保险协会(Health Maintenance Organization)认为，该技术是一项精确和可靠的并能指导医生选择用药的先进技术，建议在全美进行医疗保险赔付。目前在加州等6个州已获医疗保险赔付。
（3）2003年日本厚生省和保险联合会也认为，该技术是一项先进的临床医学项目，该技术指导的肿瘤化疗较传统的化疗方案更能明显提高胃肠道肿瘤的治愈率，建议该项技术在全国范围内获得医疗保险赔付。3.应用价值和前景展望（1） 设计个体化治疗方案
（2） 研究新的联合化疗方案
（3） 化疗药物新适应症研究