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足印图谱法

王朝百科·作者佚名  2010-01-20  
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足印图谱法 foot printing method

足印图谱法 foot printing method 为利用DNA与蛋白质结合,在结合的区域不易再受DNA分解酶或化学修饰下而分析与蛋白质相互作用的DNA部位的方法。是与指纹图谱法对比而提出的术语,意思是分析DNA上印有的蛋白质印迹。具体作法是,用32P标记含有作为目标领域的DNA片段的一个末端。在与蛋白质结合之后,用DNA分解酶(核酸内切酶)在温和条件下使之发生作用,或在一定条件下用化学方法分解DNA。分解产物可用聚丙烯酰胺凝胶电泳法按链长将之分开,用放射自显影法而测定DNA的片段。在不存在蛋白质的情况下,DNA从标记的末端开始,在不规则的部位被分解,可得到连续的梯状花纹。与此相反,与蛋白质结合时,因该部分的DNA不分解,花纹就变得不连续的状态,结合蛋白的部分可在梯状花纹的空白部分找出。应用此法可分析阻遏物和RNA聚合酶的结合部位。

 
 
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