纸上层析
纸上层析是利用混合物中各组分在固定相和流动相中的溶解度不同而达到分离目的，常用滤纸作载体，滤纸上所吸收的水分作固定相，有机溶剂作流动相，称展开剂。层析法有专用滤纸，也可用质量较好的普通滤纸代替。滤纸要清洁、均匀、平整，剪好的滤纸条没有斜的纸纹，按一定规格剪成纸条备用。所用展开剂应对被分离物质有一定溶解度，通常为含一定比例水的有机溶剂。如分离甲基橙和酚酞可用水-正丁醇溶液作展开剂。
操作时，先要点样。取少量试样，用水或易挥发的有机溶剂（如乙醇、丙酮等）使它完全溶解，配制成浓度约1％的溶液。在滤纸上距一端约2～3厘米处用铅笔画一记号作为原点，用毛细管或微量注射针筒吸取少量试样溶液在原点滴一小滴，每滴试样体积为0.002～0.02毫升，控制点样直径在0.3～0.5厘米左右。晾干后再在原点处重复上述操作1～2次。将已点样并晾干的滤纸悬挂在层析槽内，并使滤纸下端（有点样一端）边缘浸入展开剂液面下约0.5～1厘米，但点样的位置必须在展开剂液面之上，将层析槽盖上。借助于毛细现象，展开剂带动试样中各组分以不同速度沿滤纸逐渐向上移动，因各组分在固定相和流动相中溶解度不同，从而使混合物中各组分在流动相中移动距离不同而得到展开。有的组分展开后就可显示出不同颜色，但有的组分展开后不显色，还要进行显色反应。一般可用显色剂喷雾法使各组分显色，如分离甲基橙和酚酞时用氨水作显色剂，酚类可用三氯化铁的乙醇溶液显色，也有用紫外光照射显色的。
Fe2+和Cu2+的纸上层析 （1）在滤纸中心滴一滴氯化铁和硫酸铜的混合液，液滴直径约0.5厘米，防止待干。（2）把上述的滤纸剪开一小口，剪到点样痕迹，小条宽2-3厘米。把小条向上折至直角。（3）把折好的滤纸放在一盛有10毫升的丙酮－盐酸溶液的培养皿上，使剪开的小条浸入混合液。（4）待滤纸的中心的样点痕迹的直径展开到滤纸直径的三分之二左右时，取下滤纸，放在一盛有浓氨水的培养皿上，用氨气熏。注意不要把氨水直接浸到滤纸上。（5）不一会，可以看到滤纸上出现两个有色的同心圆圈，外圆是黄色环，内圆是蓝色环。
甲基橙和酚酞的纸上层析 （1）再滤纸的中心滴一滴甲基橙－酚酞的混合液（或围绕滤纸中心，距中心约一厘米处滴几个点），液滴直径约0.5厘米，放置待干。（2）在上述滤之中心扎一个小洞，插上一根滤纸捻成的细纸芯。（3）把插好的滤纸芯的滤纸放在有正丁醇－氨水的混合液的培养皿上，使纸芯浸入混合液。随着液体的渗吸，滤纸中心的黄色样点痕迹向外逐渐扩大，成为黄环。（4）待黄环半径扩展至滤纸半径的二分之一时，取下滤纸，拔下纸芯。等滤纸稍干后，喷上饱和的碳酸钠溶液，于是在甲基橙外面出现了一个酚酞的红环。