牛弓形虫病
牛弓形虫病是由弓形虫原虫所引起的人、畜共患疾病。家畜弓形体病多呈隐性感染;显性感染的临床特征是高热、呼吸困难、中枢神经机能障碍、早产和流产。剖检以实质器官的灶性坏死,间质性肺炎及脑膜脑炎为特征。
病 原
形态 弓形虫在整个生活史过程中可出现以下几种不同的形态。
滋养体 呈香蕉形或半月形。长4~7um,宽2~4um。用瑞氏染色见核呈红色,胞浆呈蓝色。电镜下见虫体外包以双层质膜,内外质膜对称,虫体由3个极环将虫体冠部包围,在3个极环的后面有类圆锥体、棒状或微线体从类圆锥体中心通过,达到最前端的外质膜。虫体内,细胞核的周围有线粒体,此外,还有高尔基附加体、内质网、糖原颗粒、嗜饿颗粒等。
包囊 (1)在慢性或隐性感染的机体内,滋养体在肌肉、脑细胞内繁殖,积聚为10~60um的圆形体,外由虫体分泌的薄膜包围,内有上千个虫体。
(2)在急性感染的机体细胞内滋养体繁殖,积聚为15—40um的圆形体,外膜由宿主细胞所构成,包囊内有几个至几十个虫体,当细胞崩裂后,虫体便游离而出成滋养体。
卵囊 呈圆形或卵圆形,淡灰色,大小为10.7um×l2.2um,有一层光滑的薄囊壁。囊内充满小颗粒,在外界适宜环境中,卵内发育形成2个孢子囊,每个孢子囊内又有4个长形微弯的孢子体,发育成孢子体的卵囊才具有传染性,抵抗力极强。
裂殖体 仅见于猫小肠绒毛上皮细胞内。成熟的裂殖体呈圆形,直径为12—15um,内有10~15个香蕉状裂殖体。
配子体 位于猫小肠绒毛上皮细胞内。雌配子体圆形,直径为10um,成熟后形成12~32个新月形,雄配子长3 um,有2条鞭毛,雌配子直径15—20um,呈圆形。
培养 弓形虫滋养体可以在很多种动物细胞中培养,如猪肾、牛肾、猴肾等原代细胞,以及其他种传代细胞,均能发育好。接种后30min,虫体即可钻人细胞。
抵抗力 卵囊对酸、碱、普通消毒剂、胰酶及胃酶等都有相当高的抵抗力。对干燥及热抵抗力较弱,50℃30min、55—60℃15min、70℃2min、80℃1 min可使卵囊感染力丧失,28%氨水对粪便中的卵囊有毒效力极强。
滋养体对热、干燥、日光、化学药物极敏感。低温有利于存活。4℃以下,保存51d,-196℃中保存419d。1%来苏儿、1%盐酸,1min内可杀死虫体。
包囊对热敏感。50℃30min、56℃10~15min即丧失活力。低温有利于保存。冰冻状况下的猪肉内的包囊可保存35d。乙酸、过氧乙酸为包囊有效的消毒剂。
流行病学
传染来源 隐性感染或临床型的猫、人、畜、禽、鼠及其他动物都是本病的传染来源。由于能排出卵囊,而且卵囊又能在外界环境中长时间贮存,故是最危险的传染来源。其次是大量间宿主或隐性感染机体的脑、肌肉内存留有弓形虫包囊;急性病例体内及乳汁、唾液、精液中含有滋养体,所以,当吃进含有包囊的猪肉、乳汁等皆可引起感染。
传播途径 分为先天和后天感染。
先天感染 即通过胎盘、子宫、产道等而感染。日本在死胎猪、我国湖北省畜牧兽医所从流胎儿脏器、羊水及腹、胸水,以及铁岭种畜场从流产胎羊中都分离到弓形虫,人也从脑积水畸胎儿中分离出弓形虫,这都说明先天性感染在人和家畜中均有存在。
后天感染 主要是通过消化道吞食了能耐胃酸的卵囊或包囊而感染。污染的饲料、饮水及屠宰残渣是最常见的传染媒介;呼吸道感染、皮肤划痕、同栖及交配,以及输血等接触途径,均可导致感染。
流行特征
感染情况 本病为世界流行。我国经血清学或病原学证实自然感染的动物有16种,其中以猫、猪最为严重。猪感染率通常在20%以上,感染弓形虫的猪,脑内可长期存留包囊,故危害最大。
季节性 弓形虫卵囊孵育与气温、湿度有关,故常以温暖、潮湿的夏、秋季节多发。弓形虫的发病季节十分明显,多发生在每年气温在25~27℃的6月间。
年龄 幼龄牛比成年牛敏感,随着年龄增长感染率增长。
临床症状
突然发病,最急性者约经36h死亡。病牛食欲废绝,反刍停止;粪便干、黑,外附黏液和血液;流涎;结膜炎、流泪;体温升高至40—41.5℃,呈稽留热;脉搏增数,每分钟达120次,呼吸增数,每分钟达80次以上,气喘,腹式呼吸,咳嗽;肌肉震颤,腰和四肢僵硬,步态不稳,共济失调。严重者,后肢麻痹,卧地不起;腹下、四肢内侧出现紫红色斑块,体躯下部水肿;死前表现兴奋不安、吐白沫,窒息。病情较轻者,虽能康复,但见发生流产;病程较长者,可见神经症状,如昏睡,四肢划动;有的出现耳尖坏死或脱落,最后死亡。
病理变化
皮下血管怒张,颈部皮下水肿,结膜发绀;鼻腔、气管黏膜点状出血;阴道黏膜条状出血;真胃、小肠黏膜出血;肺水肿、气肿,间质增宽,切面流出大量含泡沫的液体;肝脏肿大、质硬、土黄色、浊肿,表面有粟粒状坏死灶;体表淋巴结肿大,切面外翻,周边出血,实质见脑回样坏死。
诊断
病原学检查
病料直接涂片 生前可取腹股沟浅淋巴结,急性死亡病例可取肺、肝、淋巴结直接抹片,染色、镜检发现10~60/um直径的圆形或椭圆形小体。
小白鼠接种 取组织病料1;10生理盐水悬液o.5~1.0mL,接种于小白鼠腹腔,接种后1~2周小白鼠出现蜷缩、闭目、腹部膨胀、呼吸困难至死亡。腹水抹片可发现滋养体。对小白鼠不敏感的虫株,可以采取大剂量接种来获得虫体。
血清学诊断
染色试验 新鲜弓形虫易被碱性美蓝着色,但在有弓形虫抗体及同时含有辅助因子(致活剂)的新鲜人血清时,可使虫体胞浆变性,不易为美蓝着色。血清滴度1:8稀释时,能使50%虫体不着色,即认为阳性。1;256视为活性感染,1:1 024视为急性感染。通常动物感染弓形虫1周后血清滴度增高,4—6周达到高峰,以后下降并维持较长时间。
间接血凝试验(IHA) 由于本法具有快速、简易、实用及效果确实的优点,已广泛用于弓形虫病的诊断及流行病学调查。
皮内试验 以弓形虫超声波裂解物腹腔或耳根皮内注射,注射后24 h出现红肿反应,肿胀中央遗留一个5mm×5mm黑色坏死点,即为阳性。本法用于猪,认为有较高的特异性和敏感性。
免疫荧光诊断 取肺、淋巴结组织作触片,固定、染色、镜检。如各视野内有大量特异性荧光的弓形虫,其胞浆为黄绿色荧光,胞核暗而不发荧光,虫形态为月牙形,枣核形。即可确诊。
类症鉴别诊断 牛弓形虫病发生在夏、秋季,北京地区前次流行在8月份,症状表现高烧、胃肠炎、瘫痪卧地,与牛流行热的流行极其相似,故应进行鉴别。为此,可取病牛血液,提取血清,以间接法(双层法)染色,镜检,观察有无特异性荧光细胞,如果没有,证明牛流行热为阳性。同时,取病死牛肺、淋巴结作触片,染色,镜检。如视野下发现细胞浆为黄绿色荧光,核暗不发荧光,虫体呈月牙形、枣核形,即可确诊为牛弓形由。
治 疗
一旦疫病流行,首将病牛隔离,全群牛进行血清学检验,了解血清抗体水平,防止垂直感染。治疗应及时,越早越好。
磺胺制剂对本病有极其好的疗效,故为临床治疗普遍采用。
磺胺5—甲氧嘧啶(SMD) 按每日每千克体重30~50mg,静脉注射,连续注射3~5d。
磺胺嘧啶(SD)、磺胺间甲氧嘧啶(SMM) 按30—50mg/kg体重一次静脉注射,如配合使用甲氧苄氨嘧啶,或磺胺增效剂(TMP)按10~15mg/kg体重一次静脉注射效果更佳。
氯苯胍 剂量为10~15mg/kg体重,一次内服,每日服两次,连服4~6d。
二磺酰胺基-4-4‘二氨基联苯砜(SDDS) 剂量为10mg/kg体重一次肌肉注射,连续7d。
痢特灵 按10mg/k鹰体重,一次内服,连服7d。
预 防
(1)已发生过弓形虫病的奶牛场,应定期的进行血清学检查,及时检出隐性感染奶牛,并进行严格控制,隔离饲养,用磺胺类药物连续治疗,直到完全康复为止。
(2)坚持兽医防疫制度,保持牛舍、运动场的卫生,粪便经常清除,堆积发酵后才能在地里施用;开展灭鼠,禁止养猫。
(3)已发生流行弓形虫病时,全群牛可考虑用药物预防。饲料内添喂SMMl00mg/kg和磺胺嘧啶5mg/kg,连续7d,可防止卵囊感染。
(4)江苏农业科学院(1982)以组织培养的弓形虫,通过紫外光照射致弱,培育出一株弱毒株接种后月.具有坚强免疫力,免疫期6个月。