等电聚焦电泳
等电聚焦电泳(IFE,isoelectric focusing electrophoresis)
利用特殊的一种缓冲液(两性电解质)在凝胶(常用聚丙烯酰胺凝胶)内制造一个pH梯度,电泳时每种蛋白质就将迁移到等于其等电点(pI)的pH处(此时此蛋白质不再带有净的正或负电荷),形成一个很窄的区带。
pH梯度制作利用的两性电解质(ampholyte,商品名为ampholine),是脂肪族多胺和多羧类的同系物,他们具有相近但不同的pKa和pI值。在外电场作用下,自然形成pH梯度。
凝胶可用:聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、葡聚糖凝胶等