双糖铁培养基
成份：
下层：蛋白胨1克 氯化钠 0．5克
葡萄糖0．2克琼脂0．3-0．5克
水 100毫升
将上述物质混匀调PH7．6后加1．2%酚红0．4毫升
上层：蛋白胨 1克 氯化钠 0．5克
乳糖1克硫代硫酸钠0．03克
硫酸亚铁0．02克 琼脂 1克
水 100毫升
制法： 1将下层配好，分装中号试管（1毫升），塞好包扎，15磅高压灭菌半小时，使凝固后备用。
2制上层时，先将蛋白胨水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解PH8．1，再加入酚红分瓶，（每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112℃消毒15分钟）。
3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。
标准：无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。