菌落杂交法

菌落杂交法 colony hybridization method

以质粒为载体进行DNA克隆繁殖所用的方法，即从多数寄主菌的菌落中，将含特定的碱基排列顺序的DNA，通过与其碱基排列顺序互补的RNA或DNA杂交而进行检出和选择的方法。一般是使在琼胶培养基上形成含有质粒的菌落后，在其上面压附一层硝酸纤维素薄膜，将菌落移于薄膜上。用碱处理同时引起溶菌和DNA变性后，在薄膜上各个群落的位置上分别将变性的DNA固定起来，然后与用放射性同位素标记的特定的RNA或DNA片断杂交，再用放射自显影法来鉴别含有所希望的DNA排列顺序的寄主菌的菌落，最后从原来的琼胶培养基上的菌落中选出其相应的材料。