竞争引物PCR

王朝百科·作者佚名  2010-02-13  
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竞争引物PCR(COP-PCR)针对靶DNA一个侧点突变设计出两个等位特异性寡核苷酸(allele specific oligonucleotide,ASO),一个为正常引物,一个为突变引物。与AS-PCR(allele specific PCR,等位特异性PCR)引物不同的是,竞争引物(competitive oligonucleotide primer,COP)的突变点在引物中间,长度为12-16个核苷酸为宜。二者竞争与模块同一位点复性,完全互补引物复性机会大于单碱基错配引物20-100倍。如果只有一个引物作标记,对不同的模板,竞争扩增结果不同。已证明十二种类型的错配碱基中的七种适用于本技术:A/A、G/G、G/A、C/A、C/C、T/C和T/G。有人已用COP-PCR测定了次黄嘌呤磷酸核糖转移本科基因和Hbs基因的点突变。

 
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