原位多聚酶链式反应技术
原位多聚酶链式反应技术是多聚酶链式反应(PCR)技术的一部分,后者是在体外经酶促反应将某一特定DNA序列进行高效、快速扩增,它可将单一拷贝的待测核酸以指数的形式扩增而达到常规方法可检测的水平,但不能进行组织学定位。原位PCR(in situ PCR)技术是将PCR的高效扩增与原位杂交的细胞及组织学定位相结合,在冷冻或石蜡包埋组织切片,细胞涂片或培养细胞爬片上来检测和定位核算的技术。
原位PCR技术有直接法原位PCR,间接法原位PCR,原位反转录PCR和原位再生式序列复制反应等方法,其中应用较为广泛的是间接原位PCR方法,其主要程序有组织固定,预处理,原位扩增及扩增产物的原位杂交和检测等。由于使用原位杂交技术对扩增产物作检测,使间接法的特异性较直接法高。