印迹技术

概念:印迹技术是指将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法。

southern印迹

概念:将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。

过程:DNA分子被限制酶切，经琼脂糖凝胶电泳，将DNA片段按照分子量大小分离，然后将含DNA片段的琼脂糖凝胶变性，将其中单链DNA转移到硝酸纤维滤膜或者其他故乡支持物上。而DNA片段的相对位置保持不变。可做下一步杂交反应。

northern印迹

概念:将RNA变性及电泳分离后，将其转移到固相支持物上的过程。

不能用碱变性，防止水解。用甲醛变性。

southern印迹的步骤:

1从组织中提取DNA

2用特定的核酸内切酶酶切

3琼脂糖凝胶电泳

4碱变性

5中和反应

6转膜

7固定

8杂交

9杂交信号检测

northern印迹的步骤:

1从细胞中提取总RNA

2甲醛凝胶变性电泳

3转膜

4固定

5杂交

6杂交信号检测

western印迹的步骤

1蛋白质样品制备

2SDS-PAGE电泳

3转膜

4封闭

5一抗孵育

6二抗孵育

7显色