STMS
STMS(Sequence-tagged microsatellites):通常又称为SSR,也可称为SSRP(Simple Sequence Repeat Polymorphisms)
基本原理和特点:
引物根据与微卫星重复序列两翼的特定短序列设计,用来扩增重复序列本身。由于重复的长度变化极大,所以这是检测多态性的一种有效方法。其特点包括:一般检测到的是一个单一的多等位基因位点;共显性遗传,故可鉴别杂合子和纯合子;得到的结果重复性很高。为了提高分辨力,通常使用聚丙烯酰胺凝胶电泳,它可检测出单拷贝差异。也可以在同一个反应试管中把PCR反应与不同的STMS引物结合起来(称为multiplexing),这可节省时间,但是,这只能在不同引物的产物在大小上不重叠的情况下才能使用。很显然,使用STMS技术的前提是需要知道重复序列两翼的DNA序列的信息,这一方面可以在其它种的DNA数据库中查询,否则就必须先建立含有微卫星的基因组文库,再从中筛选可用的克隆,进行测序,然后设计合适的引物。
STMS的发展和相近的分子标记种类:
1. 把与SSR互补的寡核苷酸作为多位点RFLP技术中的探针
2. 把与SSR互补的寡核苷酸作为PCR引物(可单独作引物或与随机引物配合使用),扩增的是基因组DNA的特定片段:即MP-PCR和RAMPs
3. 用标记的SSR探针与RAPD扩增片段杂交:即RAMPO或称为RAHM或RAMS
4. 用5′或3′端加锚的SSR作引物:即ISSR。