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分配层析法

王朝百科·作者佚名  2009-12-11  
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在分析化学领域,当人们广泛地试用吸附剂进行层析分析的时候,液-液萃取分离在金属分离上已经得以广泛应用。这种方法是马丁和辛格在1941年发明的,这种方法是用硅胶进行吸附水,水重为硅胶自身重量的50%,再装成柱体,然后将氨基酸混合物的溶液加到柱体上,这时用含少量丁醇的氯仿进行层析。这种方法可以使氨基酸分离,这一方法迅速兴起,人们称之为分配层分析法。这种方法的原理是利用了被分离物质在两相中分配系数的差别。

在上述试验中,硅胶被马丁和辛格称作担体,它在分配层析中只起负担固定液的作用,基本上呈惰性。吸着在硅胶印的液体,被称为静止相;氯仿液被称作流动相。马丁在1941年的论文中,发表了这一方法的理论根据。

分配层法在试验中克服了吸附色层法遇到的困难。比如,脂肪酸和多元醇等极性物质强烈地被一般吸附剂的吸附,即使利用洗脱能力极强的液体进行洗脱也无济于事,因而不能用吸附色层法将它们分离出来。而分配层析法则很容易将这些脂肪酸一类的极性物质分离出来。因此,这一方法在极性有机混合物的分离上迅速得到了广泛的应用,取得了良好的效果。这一方法一般以水、稀硫酸、甲醇等极性溶剂作为静止相,以非极性成弱极性物质作为流动相。1948年,摩尔和斯坦思用分配层析法从淀粉中分离了一些氨基酸。呼伍等人在同年用纤维素柱分离了糖类。

后来,在试验中,马丁发现在水蒸气饱和的空气中,滤纸吸附约22%的水分之后,也可以在分配层析法中用作静止相的支撑物,这是1944年的事情。由此,形成了分配层析法中重要的一支-纸上层析法。这种方法很快应用到对酚类、脂肪酸、氨基酸、染料、糖类、甾类化合物、肽类以及蛋白质、核糖等复杂有机物的分析上,成为生物化学中最重要的分离和分析方法之一。在无机物质的分析纸上分析法至今仍然只作为一种辅助手段。

分配层析法的出现,使分析化学又多一只“手”,它对于复杂有机物及无机物的分析都相当有效。

 
 
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