FPLC快速纯化技术

传统上，重组腺病毒的纯化方法是用CsCl（氯化

铯）线性密度梯度超速离心，仅可做少量制备，且存在铯残留问题，不适合临床级药品和工业化生产要求。1996年开始在实验室使用柱层析方法纯化重组腺病毒的技术，一般是采用阴离子柱和亲和层析柱二步方法，可高效纯化重组腺病毒。纯化工艺稳定可控，适于大规模生产。但是二步层析柱方法费时间，而且样品损失增加了30%，更重要的是处理时间的延长和环节增多，会影响样品的活性。近年来，Target Genetics、Sigma等公司发展了一步层析柱纯化方法，但由于层析填料及待纯化样品等问题，制品的纯度不及上述CsCl（氯化铯）线性密度梯度超速离心方法和二步层析柱方法。根据我们的初步经验，发展一步层析柱纯化方法的关键是：1）FPLC层析程序的设计；2）层析填料的选择；3）待纯化样品的浓缩和过滤前处理。发展该技术不仅可以用于腺病毒的纯化，同时也进一步推动我国纯化工艺工程技术的发展。